改造SARS 3CL蛋白酶用來去除組合蛋白的標誌蛋白
2025-05-09
改造SARS 3CL蛋白酶用來去除組合蛋白的標誌蛋白
本院覽號
11A-971229
公告日期
2025-05-09
智財權狀態
美國8,053,222已獲證
摘要
2003年SARS病毒爆發,其複製所需的3CLpro蛋白酶可在特定序列的11個位置切割病毒多蛋白。為將3CLpro改造成可移除重組蛋白標籤的工具,研究開發出一種偏好切割Gln↓Met 的突變蛋白酶T25G,並設計了在大腸桿菌和酵母菌中使用的表達載體,該載體在標籤蛋白和目標蛋白之間包含T25G可切割的Ala-Val-Leu-Gln↓Met序列。載體5'端選用Pst I位點進行克隆,可確保標籤切除後目標蛋白不帶額外胺基酸。自行開發的T25G 3CLpro蛋白酶活性與市售FXa相似,且能在大腸桿菌中高產量表達,降低生產成本。該蛋白酶及表達載體可與蛋白平行表達載體結合,構成完整的蛋白表達系統,可供廠商授權使用。
技術優勢
精確且高效的標籤移除 目標蛋白不帶額外胺基酸 在大腸桿菌中高表達量
應用範圍
在重組蛋白純化中移除親和標籤 生產用於結構生物學研究的蛋白質 產生治療性蛋白質 生物催化劑生產 整合式蛋白表達系統的開發
創作人
梁博煌
